Высокоэффективная жидкостная хроматография загрязнителей природных и сточных вод
2.3. Приборы, аппаратура, посуда
Жидкостный хроматограф Милихром
с ультрафиолетовым детектором
Хроматографическая колонка стальная,
длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм,
заполненная Силасорбом 600, зернением 5 мкм
Хроматограф газовый серии "Цвет" или
аналогичный, снабженный детектором постоянной
скорости рекомбинации (ДПР) с пределом
детек
тирования по линдану 4 x 10 г/куб. см
Хроматографическая колонка стеклянная, длиной
1 или 2 м, внутренним диаметром 2 - 3 мм
Микрошприц типа МШ-10, вместимостью 10 мкл ТУ 5Е2-833-024
Аппарат для встряхивания типа АВУ-6с ТУ 64-1-2851-78
Баня водяная ТУ 64-1-2850-76
Весы аналитические типа ВЛА-200 ГОСТ 34104-80Е
Камера хроматографическая ГОСТ 10565-74
Насос водоструйный ГОСТ 10696-75
Облучатель ртутно-кварцевый типа ОКН-11 ТУ 64-1-1618-77
Пульверизаторы стеклянные ГОСТ 10391-74
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М
или аналогичный ТУ 25-11-917-76
Установка компрессорная ТУ 64-1-2985-78
Шкаф сушильный ТУ 64-1-1411-76Е
Воронки делительные ГОСТ 3613-75
Колбы мерные, вместимостью 100 мл ГОСТ 1770-74
Цилиндры мерные, вместимостью 10, 50 мл ГОСТ 1770-74Е
Колбы грушевидные со шлифом,
вместимостью 100 мл ГОСТ 10394-72
Колбы конические, вместимостью 100 мл ГОСТ 22524-77
Пробирки центрифужные, мерные ГОСТ 25336-82Е
Пипетки, вместимостью 0,1, 1, 2, 5 и 10 мл ГОСТ 20292-74
Воронки химические, конусные, диаметром
34 - 40 мм ГОСТ 25336-82Е
2.4. Отбор проб
Отбор, хранение и подготовка проб проводятся в соответствии с
"Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными за N 2051-79 от 21.08.79
Отобранные пробы можно хранить в холодильнике не более 5 дней. Перед анализом воду (при наличии взвеси) фильтруют через неплотный бумажный фильтр.
2.5. Подготовка к определению
2.5.1. Метод ВЭЖХ
2.5.1.1. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ
В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают с помощью пипетки 5 мл изопопанола и 5 мл метанола, доливают до метки гексаном, перемешивают, фильтруют.
2.5.1.2. Кондиционирование колонки
Промыть колонку для ВЭЖХ смесью гексан-метанол-изопропанол (90:5:5, по объему) в течение 30 мин. при скорости подачи растворителя 100 мкл/мин.
2.5.2. Метод ГЖХ. Подготовка и кондиционирование колонки
Готовую насадку (5% SE-30 на Хроматоне N-AW-DMCS) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 250 -С в течение 10 -12 ч.
2.5.3. Метод ТСХ
2.5.3.1. Приготовление проявляющих реагентов
2.5.3.1.1. Проявляющий реагент N 1
1 г нитрата серебра растворяют в 1 мл дистиллированной воды, добавляют 10 мл 2-феноксиметанола, 190 мл ацетона, 1 - 2 капли пероксида водорода, раствор перемешивают и переносят в склянку из темного стекла.
2.5.3.2.2. Проявляющий реагент N 2
0,5 г нитрата серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды в мерной колбе на 100 мл, добавляют 10 мл 25%-ного водного аммиака, раствор доводят до 100 мл ацетоном, перемешивают и переносят в склянку из темного стекла.
2.5.3.2. Приготовление подвижной фазы для ТСХ
В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 20 мл ацетона и добавляют до метки гексан, перемешивают. Смесь наливают в хроматографическую камеру слоем не более 6 - 8 мм за 30 мин. До начала хроматографирования.
2.5.4. Приготовление стандартных растворов
Основной стандартный раствор кломазона с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г препарата, содержащего 99,8% д. в., в гексане в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
Рабочие стандартные растворы с концентрацией 0,4; 1,0; 2,0; 4,0; 10,0; 20 и 40,0 мкг/мл готовят из основного стандартного раствора кломазона соответствующим последовательным разбавлением гексаном.
Рабочие растворы хранят в холодильнике не более месяца.
2.5.5. Построение градуировочного графика
2.5.5.1. Градуировочный график А (измерение по п. 2.7.1, ВЭЖХ)
Для построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 5 мкл рабочего стандартного раствора кломазона с концентрацией 4,0; 10,0; 20,0 и 40 мкг/мл.
2.5.5.2. Градуировочный график В (измерение по п. 2.7.2, ГЖХ)
Для построения градуировочного графика в испаритель хроматографа вводят по 5 мкл рабочего стандартного раствора кломазона с концентрацией 0,4; 1,0; 2,0; 4,0 и 10,0.
Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график (А или В) зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации кломазона в растворе в мкг/мл.
2.6. Описание определения
100 мл анализируемой пробы воды помещают в делительную воронку вместимостью 250 мл, приливают 10 мл 25%-ного водного раствора гидроксида натрия, перемешивают и добавляют 20 мл н-гексана. Воронку встряхивают в течение 3 мин., после разделения фаз гексановый слой сливают в грушевидную колбу вместимостью 100 мл, пропуская его через слой безводного сульфата натрия, помещенного в конической воронке на складчатом бумажном фильтре. Извлечение препарата из водной пробы повторяют еще дважды, используя по 20 мл н-гексана. Объединенный гексановый экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40 -С почти досуха, остаток отдувают потоком воздуха или азота особой чистоты. Сухой остаток растворяют в 0,1 (ВЭЖХ, ТСХ) или 0,25 мл (ГЖХ) н- гексана и анализируют одним из хроматографических методов.
2.7. Условия хроматографирования
2.7.1. ВЭЖХ
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Милихром (Россия).
Колонка стальная длиной 64 мм, внутренним диаметром 2 мм,
заполненная Силасорбом 600, зернением 5 мкм.
Температура колонки: комнатная.
Подвижная фаза: гексан-изопропанол-метанол (90:5:5, по объему).
Скорость потока элюента: 100 мкл/мин.
Рабочая длина волны: 240 нм.
Чувствительность: 0,4 ед. абсорбции на шкалу.
Объем вводимой пробы: 5 мкл.
Время выхода кломазона: около 6 мин.
Линейный диапазон детектирования: 20 - 200 нг.
Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 40 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.
2.7.2. ГЖХ
Хроматограф газовый "Цвет-570" с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов.
Колонка стеклянная длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм, заполненная Хроматоном N-AW-DMCS с 5% SE-30 (0,16 - 0,20 мм).
Рабочая шкала электрометра 64 x 10 10Ом.
Скорость движения ленты самописца 200 мм/ч.
Температура термостата колонки - 190 -С
детектора - 300 -С
испарителя - 220 -С
Скорость газа-носителя (азота) - 60 мл/мин.
Объем вводимой пробы - 5 мкл.
Другие рефераты на тему «Экология и охрана природы»:
Поиск рефератов
Последние рефераты раздела
- Влияние Чекмагушевского молочного завода на загрязнение вод реки Чебекей
- Влияние антропогенного фактора на загрязнение реки Ляля
- Киотский протокол - как механизм регулирования глобальных экологических проблем на международном уровне
- Лицензирование природопользования, деятельности в области охраны окружающей среды и обеспечения экологической безопасности
- Мировые тенденции развития ядерной технологии
- Негативные изменения состояния водного бассейна крупного города под влиянием деятельности человека
- Общественная экологическая экспертиза и экологический контроль