Основные принципы подбора условий разделения
При этом селективность естественно, будет меняться. Можно также попытаться сменить привитую фазу на другую, оставив прежним модификатор, и за счет этого добиться требуемой селективности.
При работе в ионообменном режиме подбор условии осуществляют аналогично, начиная с наиболее сильного буферного раствора и последовательно идя к более слабому. Селективность и элюирующую силу при этом можно
менять, изменяя рН буферного раствора, вводя большие или меньшие количества модификатора — органического растворителя (метанола, ацуонитрила и др.) или заменяя один буферный раствор на другой.
В случае использования ион-парной хроматографии выбор условий включает те же факторы, которые используют в ионообменной хроматографии. Однако дополнительно селективность можно регулировать, добиваясь нужного разделения, путем увеличения или уменьшения концентрации ион-парного реагента, а также изменяя соотношение полярной и неполярной групп в молекуле ион-парного реагента.
Подвижные фазы для ВЭЖХ и ТСХ
Аналитическая ВЭЖХ уже давно играет ключевую роль в контроле технологических процессов, контроле качества фармацевтической продукции и анализе объектов окружающей среды.
Серьёзные задачи вынуждают предъявлять высокие требования к используемым в качестве подвижной фазы растворителям.
Низкое УФ-поглощение, низкое содержание механических примесей, низкая кислотность или щёлочность в совокупности с малым количеством сухого остатка после упаривания являются необходимым условием воспроизводимости разделения. Данным требованиям в полной мере удовлетворяют растворители под торговой маркой LiChrosolv®, которые производятся с использованием специально отобранных реактивов, а затем подвергаются многостадийному процессу очистки, обуславливающему неизменно высокое качество каждой партии растворителей. Растворители LiChrosolv® для ВЭЖХ производятся так, чтобы полностью исключить вероятность их загрязнения следовыми количествами каких либо побочных соединений, способных затруднить интерпретацию полученных результатов анализа.
Сочетание классической жидкостной хроматографии (ЖХ) с масс-спектрометрическим (МС) детектированием быстрыми темпами становится основным исследовательским инструментом фактически в каждой области химического анализа. ЖХ - МС сочетает в себе преимущества хроматографического разделения с масс-спектрометрическим детектированием: низким пределом детектирования и способностью устанавливать структуру анализируемых соединений (особенно важно при определении и характеризации метаболитов). Особо чистые растворители марки LiChrosolv характеризуются низким УФ-поглощением и низким содержанием ионов металлов.
Благодаря высокому качеству растворителей аналитикам удаётся избежать проведения дорогостоящих повторных анализов или потерь ценных образцов.
Система хранения растворителей
Специальные стальные контейнеры одноразового использования, разработанные компанией Мерк для высокочистых растворителей, обладают рядом преимуществ
• Отсутствием взаимодействий растворителей с материалом контейнера
• Высокой стабильностью
• Меньшими потерями растворителей
• Возможностью подсоединения дополнительного оборудования
• Меньшим риском попадания загрязнений
• Большей безопасностью работы
Растворители для аналитической хроматографии
В современной аналитической ВЭЖХ часто используется градиентный режим элюирования. Поэтому мы производим растворители, предназначенные как для изократического, так и градиентного режимов элюирования. Таким образом, при использовании этих растворителей, например, для разделения энантиомеров на хиральных фазах, негативные эффекты, связанные с градиентным режимом элюирования, сводятся к минимуму.
Что касается высокочистых растворителей марки LiChrosolv®, то дополнительно к имеющемуся у нас широкому ассортименту мы предлагаем растворители в стеклянных сосудах объёмом 1; 2.5 и 4 л, в алюминиевых бутылках объёмом 5 л и стальных контейнерах одноразового использования объёмом 10, 30 и 185 л. Более крупные объёмы поставляются под заказ. Преимущества данных контейнеров описаны в нашей брошюре, посвящённой растворителям. Идеальная линия растворителей должна непременно включать удобную и не приводящую к загрязнению систему подачи растворителей. В наличии имеется соответствующая брошюра.
Физико-химические характеристики растворителей LiChrosolv®
Кат. номер |
Продукт |
Остаток после упар. [мг/л] |
Поглощение [макс. мЕА] 210 235 254 |
Флуоресценция№ [макс. ppb] 254 365 | |||
1.00030 |
Ацетонитрил |
4 |
2.0 |
- |
0.5 |
1.0 |
0.5 |
1.11727 |
Этанол |
5 |
- |
5.0 |
2.0 |
- |
- |
1.06007 |
Метанол |
4 |
- |
2.0 |
1.0 |
1.0 |
1.0 |
1.01040 |
2-Пропанол |
5 |
- |
2.5 |
2.0 |
- |
- |
1.15333 |
Вода |
5 |
5.0 |
- |
0.5 |
1.0 |
0.5 |
1) 1 ppb соответствует 1 ppb хинина в 0,05М H2S04
*УФ-спектр ацетонитрила марки LiChrosolv®
Длина оптического пути: 1 см Кювета сравнения: вода LiChrosolv®
Информация для заказа растворителей LiChrosolv®
Название |
Каталожный номер |
Чистота (ГХ) мин.[%] |
Сухой остаток макс, [мг/л] |
Вода макс. [%] |
Кислот-ность макс, [мэкв/г] |
Щёлоч-ность макс, [мэкв/г] |
Пропуска-емое™ УФ на нм [%] |
Объём |
Ацетон |
1.00020.1000 1.00020.2500 1.00020.4000 1.00020.5000 |
99.8 |
2 |
0.05 |
0.0002 |
0.0002 |
335(50%) 340(80%) 350(98%) |
1л 2.5 л 4л 5л |
Ацетонитрил ос.ч. hypergrade для жх/мс* |
1.00029.1000 1.00029.2500 1.00029.9010 1.00029.9030 |
99.9 |
1 |
0.01 |
0.0001 |
0.0002 |
191(25%) 195(85%) 200(96%) |
1л 2.5л 10л 30л |
Ацетонитрил градиентный |
1.00030.1000 1.00030.2500 1.00030.4000 1.00030.5000 1.00030.9010 1.00030.9030 1.00030.9185 |
99.9 |
2 |
0.02 |
0.0002 |
0.0002 |
193(60%) 195(80%) 230(98%) |
1л 2.5л 4л 5л 10л 30л 185л |
Ацетонитрил изократический |
1.14291.1000 1.14291.2500 1.14291.4000 1.14291.5000 1.14291.9010 1.14291.9030 1.14291.9185 |
99.8 |
4 |
0.05 |
0.0005 |
0.0002 |
195(70%) 200(90%) 240(98%) |
1л 2.5л 4л 5л 10л 30л 185л |
Бензол |
1.01768.1000 |
99.8 |
2 |
0.03 |
0.0002 |
0.0002 |
285(70%) 290(90%) 340(98%) |
1л |
нБутанол |
1.01988.1000 1.01988.2500 |
99.8 |
2 |
0.05 |
0.0002 |
0.0002 |
230(75%) 240(85%) 310(99%) |
1л 2.5л |
Третбутил метиловый эфир |
1.01845.1000 1.01845.2500 |
99.8 |
2 |
0.02 |
0.0002 |
0.0002 |
240(60%) 255(85%) 280(98%) |
1л 2.5л |
Хлороформ, стабилизированный |
1.02444.1000 1.02444.2500 1.02444.4000 |
99.8 |
5 |
0.01 |
0.0002 |
0.0002 |
255(70%) 260(85%) 300(98%) |
1л 2.5л 4л |
1-хлорбутан |
1.01692.1000 |
99.8 |
2 |
0.01 |
0.0002 |
0.0002 |
227(60%) 232(80%) 250(98%) |
1л |
Циклогексан |
1.02827.1000 1.02827.2500 |
99.9 |
2 |
0.01 |
0.0002 |
0.0002 |
230(75%) 240(90%) 260 (99%) |
1л 2.5л |
1,2-дихлорэтан |
1.13713.1000 |
99.8 |
2 |
0.02 |
0.0002 |
0.0002 |
240(85%) 245(90%) 270(99%) |
1л |
Дихлор-метан, стабилизи- рованный |
1.06044.1000 1.06044.2500 1.06044.4000 |
99.9 |
5 |
0.01 |
0.0002 |
0.0002 |
240(70%) 245(90%) 260(99%) |
1л 2.5л 4л |
1,4-диоксан |
1.03132.1000 1.03132.2500 |
99.8 |
2 |
0.02 |
0.0002 |
0.0002 |
245(50%) 270(80%) 300(98%) |
1л 2.5л |
Этанол градиентный |
1.11727.1000 1.11727.2500 1.11727.4000 |
99.9 |
2 |
0.1 |
0.0002 |
0.0002 |
225(60%) 240(85%) 260(98%) |
1л 2.5л 4л |
Этилацетат |
1.00868.1000 1.00868.2500 1.00868.4000 |
99.8 |
2 |
0.05 |
0.0002 |
0.0002 |
260(50%) 265(80%) 270(98%) |
1л 2.5л 4л |
Н-гептан |
1.04390.1000 1.04390.2500 1.04390.9010 1.04390.9030 |
99.3 |
2 |
0.005 |
0.0002 |
0.0002 |
210(50%) 220(80%) 245(98%) |
1л 2.5л 10л 30л |
Н-гексан |
1.04391.1000 1.04391.2500 1.04391.4000 1.04391.5000 1.04391.9010 |
98.0 |
1 |
0.01 |
0.0002 |
0.0002 |
210(50%) 220(80%) 245(98%) |
1л 2.5л 4л 5л 10л |
Изогексан |
1.04335.2500 |
99.0 |
2 |
0.005 |
0.0002 |
0.0002 |
210(60%) 220(80%) 245(98%) |
2.5л |
Изооктан |
1.04717.1000 1.04717.2500 |
99.0 |
2 |
0.01 |
0.0005 |
0.0002 |
210(50%) 220(80%) 270(98%) |
1л 2.5л |
Метанол ос.ч. для ЖХ/МС |
1.06035.1000 1.06035.2500 |
99.9 |
1 |
0.01 |
0.0002 |
0.0002 |
210(35%) 220(60%) 230(75%) |
1л 2.5л |
Метанол градиентный |
1.06007.1000 1.06007.2500 1.06007.4000 1.06007.5000 1.06007.9010 1.06007.9030 1.06007.9185 |
99.9 |
2 |
0.02 |
0.0005 |
0.0002 |
220(55%) 235(83%) 260(98%) |
1л 2.5л 4л 5л 10л 30л 185л |
Метанол |
1.06018.1000 1.06018.2500 1.06018.5000 1.06018.9010 1.06018.9030 1.06018.9185 |
99.8 |
3 |
0.03 |
0.0005 |
0.0002 |
225(50%) 240(80%) 265(98%) |
1л 2.5л 5л 10л 30л 185л |
1-пропанол |
1.01024.1000 1.01024.2500 |
99.8 |
2 |
0.02 |
0.0005 |
0.0002 |
230(70%) 240(80%) 270(98%) |
1л 2.5л |
2-пропанол |
1.01040.1000 1.01040.2500 1.01040.5000 1.01040.9010 1.01040.9030 |
99.9 |
2 |
0.05 |
0.0005 |
0.0002 |
220(80%) 230(90%) 250(98%) |
1л 2.5л 5л 10л 30л |
Четырёххорис тый углерод |
1.02223.1000 |
99.9 |
5 |
0.01 |
0.0002 |
0.0002 |
270(50%) 275(80%) 290(98%) |
1л |
Тетрагидро фуран |
1.08101.1000 1.08101.2500 1.08101.4000 1.08101.9010 |
99.9 |
1 |
0.02 |
0.0005 |
0.0002 |
260(80%) 270(90%) 310(99%) |
1л 2.5л 4л 10л |
Толуол |
1.08327.1000 1.08327.2500 1.08327.4000 |
99.9 |
2 |
0.05 |
0.0005 |
0.0002 |
300(70%) 310(80%) 350(98%) |
1л 2.5л 4л |
1,2,4-трихлор-бензол |
1.15224.1000 |
99.0 |
2 |
0.01 |
0.002 |
0.0002 |
315(50%) 320(80%) 385(98%) |
1л |
Вода градиентная |
1.15333.1000 1.15333.2500 1.15333.9010 1.15333.9030 |
5 |
1л 2.5л 10л 30л |